Cascade de criblage typique dans un programme intégré en inflammation
Oncodesign a plus de 25 ans d’expérience dans les services de pharmacologie, d’abord en oncologie puis étendus aux maladies inflammatoires. Une large gamme de modèles in vivo est disponible ou peut être développée pour une demande spécifique.
Ici, notre client voulait développer un nouvel inhibiteur de kinase utilisé dans le traitement des maladies inflammatoires de l’intestin. Oncodesign a ainsi développé la cascade de criblage permettant de délivrer des candidats précliniques :
- Criblage cellulaire
- Test in vitro sur sang total
- ADME précoce
- PK/PD
- Validation in vivo
Ici, nous montrons les données de l’in des candidats sélectionnés ODS’002, qui a été préparé et testé en plusieurs étapes.
Dosage in vitro
Un test d’inhibition de liaison alphaLISA a été réalisé pour valider l’activité d’ODS’002 avec la cible souhaitée.
Légende : Inhibition de la cible de la kinase recombinante humaine – test de liaison avec alphaLISA – IC50 = 0,2 nM
Par la suite, un criblage cellulaire a permis d’évaluer la capacité d’ODS’002 à inhiber l’expression de TNFα induite par L18-MDP. Le dosage a été réalisé et validé sur des cellules PBMC de souris, de rat et humaines.
Légende : Inhibition du TNFα induite par le L18-MDP – Dosage sur cellules de macrophages de souris. IC50 = 5nM
Légende : Inhibition du TNFα induite par le L18-MDP – Engagement de cible ex-vivo – Analyse sur sang total humain. IC50 = 3nM
Evaluation ADME précoce
A la suite de la validation initiale de l’ADME in vitro, le profil pharmacocinétique a été évalué. Voici le profil d’ODS’002 chez le rat permettant de calculer sa biodisponibilité.
Légende : Pharmacocinétique chez le rat (clairance IV et biodistribution PO, avec un Tmax d’environ 2h) – Biodisponibilité = 85% (ratio DNAUC orale / DNAUC IV)
DNAUC: dose-normalized area under the curve
Pour compléter le profil, la relation PK/PD chez la souris a été évaluée. Le composé test ODS’002 a été administré oralement (PO), suivi d’une induction par L18-MDP de l’expression de TNFα par intra-veineuse(à T+1h). La quantification de l’expression du TNFα est réalisée à T+2h (PO Tmax).
Légende : Relation pharmacocinétique/pharmacodynamique chez la souris – Administration aiguë
Engagement de cible in vivo IC50 ~0,1 mg/kg
Validation in vivo, modèle de colite chronique chez la souris induite par anti-CTLA4 et DSS
Plusieurs paramètres sont utilisés pour démontrer l’effet thérapeutique des composés testés (surveillance du poids de la souris ; expression du gène cible colique ; histologie pour la notation de la maladie ; quantification des cellules caliciformes et du mucus ; épaisseur épithéliale de la muqueuse colique).
Légende : Modèle de colite / combinaison d’anti-CTLA-4 et de DSS (Dextran Sodium Sulfate), un irritant chimique. ODS’002 protège le côlon de l’épaississement épithélial induit par l’inflammation
Cette étude de cas est un exemple concret de notre expertise incluse dans notre offre de service INPACT PoC Inflammation . Contactez-nous pour voir comment nous pouvons avoir un impact sur votre programme de recherche.